目的 不同组植原体检测和鉴别的特异性探针已有报道，为了筛选出适合于我国不同组植原体检测和鉴别的特异性探针，建立管芯片检测和鉴别植原体技术，并对我国发生的疑似植原体病害进行鉴别。 方法 通过PCR扩增结合管芯片杂交技术，对收集到的15种植原体侵染的植物样品及其健康对照进行检测和鉴别。 结果 建立了管芯片检测和鉴别植原体技术体系。15种病害样品中，13种获得显著的阳性杂交信号，并且所有的健康对照都呈现为阴性。13种植原体病害依16Sr DNA直接测序可分为16Sr Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、XIX四组植原体。在所有探针中，植原体的通用探针(Pp-502)可以检测到所有确定的植原体样品。16SrⅠ组特异性探针(PpⅠ-465)可以确定16SrⅠ组的泡桐丛枝、苦楝丛枝、桑树萎缩和莴苣黄化4种植原体样品。16SrⅡ组特异性探针(PpⅡ-629)仅可以确定16Sr Ⅱ组的花生丛枝、甘薯丛枝和臭矢菜丛枝3种植原体样品。但16SrⅤ组的枣疯病、樱桃致死黄化和重阳木丛枝及16Sr XIX组的板栗黄化皱缩植原体与其他组专化性探针皆有明显的交叉杂交信号。相比于PCR扩增的凝胶电泳检测，管芯片检测的灵敏度提高了1 000倍。对疑似植原体病害的诊断结果显示河南濮阳的红花槐丛枝的病原应为16SrⅤ组植原体，福建福州的长春花黄化丛枝应为16SrⅠ组植原体；而北京戒台寺牡丹黄化皱叶和内蒙古包头柳树丛枝未出现任何植原体专化的杂交信号。 结论 管芯片杂交技术作为一种检测和鉴别植原体的方法，可应用于我国植原体病害调查和诊断，并为植原体的鉴别和分类提供可靠的依据。

从1975至2006年的有关科技资料中,汇总到中国1竹亚科10属148竹种(分类单位)上的病原物208种,其中真菌183种、细菌1种、难培养原核生物2种、病毒1种、线虫3种、螨类18种。分别列出了病害名称、竹种、病原物和分布省份。根据最新分类系统确定了各类病原物(分别真菌、细菌、病毒、线虫、螨类)的分类地位,它们隶属于5纲、22目、2总科、47科、112属。这对了解竹林生态系统组成、生物多样性、防控外来有害生物以及竹病检疫和防治都有重要的参考作用。

从1975至2006年的有关科技资料中,汇总到中国1竹亚科10属148竹种上的病原物208种,其中真菌183种、细菌1种、难培养原核生物2种、病毒1种、线虫3种、螨类18种。分别列出了病害名称、竹种、病原物和分布省份。根据最新分类系统确定了各类病原物(分别真菌、细菌、病毒、线虫、螨类)的分类地位,它们隶属于5纲、22目、2总科、47科、112属。这对了解竹林生态系统组成、生物多样性、防控外来有害生物以及竹病检疫和防治都有重要的参考作用。

目的 建立稳定的食线虫真菌淡紫紫孢菌遗传转化体系，并获得插入突变体。 方法 介导的方法，以淡紫紫孢菌20-7的分生孢子为受体，将新构建的携带beta tubulin基因的质粒转化进入淡紫紫孢菌的细胞中，通过优化诱导乙酰丁香酮（AS）的浓度、诱导培养时间、农杆菌终浓度 OD₆₆₀值、共培养 AS 的浓度、共培养时间和共培养温度等因子，建立高效遗传转化体系，获得致病力不同的突变体。 结果 共培养过程中使用萌发孢子是成功建立淡紫紫孢菌遗传转化体系的必要条件；淡紫紫孢菌萌发的孢子与农杆菌EHA105在25 ℃共振荡培养48 h时，且在共培养阶段当乙酰丁香酮浓度为 200 µg·mL⁻¹（pH5.5）时转化效率最高，转化效率为1 200～3 200个转化子/10⁶分生孢子， 阳性抗性转化子比率为96%；转化子PCR表明，T-DNA已整合到淡紫紫孢菌的基因组中；Southern 杂交验证表明，83.3% 的转化子为T-DNA 单拷贝插入；成功建立了可靠的淡紫紫孢菌的遗传转化体系，并从20个转化子中筛选到16个致病力变异的突变体。 结论 本研究成功构建了农杆菌介导的、以beta-tubulin基因为选择标记的淡紫紫孢菌高效遗传转化体系，并获得致病力变异的插入突变体，为淡紫紫孢菌的基因功能、致病机制研究及优良菌株选育奠定了基础。

利用来自不同地域的淡紫拟青霉的13个菌株,分别用其孢子液处理南方根结线虫分散卵粒、菌丝处理分散卵粒、孢子液处理卵囊以评价淡紫拟青霉对南方根结线虫的寄生性。在被试所有菌株中,同一菌株三种不同方法对根结线虫卵的寄生率相比,孢子液处理卵囊均明显高于其他两种处理。不同菌株对南方根结线虫卵的寄生率有很大的差异。三种处理方法结果显示618号菌株寄生率均为最高。菌株对卵的寄生率与菌株地理来源无明显相关性。

厚壁轮枝菌对根结线虫虫卵有很强的寄生力,是线虫的生防菌,本文对其最适培养条件进行了研究。每12 h对其产孢情况进行跟踪,探讨了不同C、N源,初始pH值,无机盐对其产孢量的影响,确定了适宜的培养条件及发酵终止时间。结果显示,28℃下,在160 r.m in-1摇床上,以500 mL三角瓶200 mL的装量进行液体培养,筛选出的最佳复合培养基配方为:葡萄糖20 g.L-1,玉米粉20 g.L-1,黄豆粉20 g.L-1,KH2PO40.5 g.L-1,MgSO4.7 H2O0.5 g.L-1。最佳pH值范围5.07.0,最适发酵终止时间120144 h。

测试了木腐菌对松材线虫繁殖的影响以及对马尾松木块和松材线虫病病死树伐桩的分解能力,结果表明,供试菌株除裂褶菌菌株外,其他菌株都能抑制松材线虫的繁殖,其中松材线虫在松生拟层孔菌菌株W10、W11,硫磺菌菌株5452、6600,粗皮侧耳菌株6221,虎掌菌菌株6320,茯苓菌株6284,灵芝菌株6501菌落上完全不能存活。对马尾松木块的分解试验结果表明,松生拟层孔菌菌株W10、W11、硫磺菌菌株6600、杂色云芝菌株6923、茯苓菌株6284对马尾松木块具有较强的分解能力。田间接种硫磺菌菌株6600、杂色云芝菌株6923、松生拟层孔菌菌株W11、茯苓菌株6284和粗皮侧耳菌株6221处理松材线虫病病死树伐桩70 d后,硫磺菌菌株6600和杂色云芝菌株6923表现出对松材线虫病病死树伐桩较强的分解能力,这2个菌株可作为今后利用木腐菌处理松材线虫病病死树伐桩的潜力菌株。

将球孢白僵菌孢悬液分别与海藻糖、葡萄糖、L－丙氨酸和FeSO4 4种增效剂混合,各自配成4种不同浓度的增效剂白僵菌孢悬液,接种于松墨天牛幼虫体表。结果表明, 4种增效剂在白僵菌防治松墨天牛幼虫的过程中都起到一定的增效作用,添加海藻糖可使天牛幼虫的致死率平均提高18. 05%,葡萄糖平均提高8. 75%。第11天时, 4种浓度海藻糖使天牛幼虫的致死率分别提高23. 1%、76. 9%、15. 4%、53. 8%;葡萄糖分别提高30. 8%、0. 0%、53. 8%、7. 7%; L－丙氨酸分别提高38. 5%、23. 1%、23. 1%、- 7. 7%; FeSO4 分别提高14. 04%、36. 39%、16. 71%、20. 67%。

Soil samples were collected to a depth of 20 cm using a 3.0 m×3.0 m grid in 900 m2(30.0 m×30.0 m) plots for analysis of spatial patterns of soil in undisturbed area of China fir (Cunninghamia lanceolata) and Masson pine(Pinus massoniana) mixed forest in the Three Gorger Reservoir Areas. The investigation data showed that the average of soil DNA content was 922.71 μg·g-1 water-free soil, the maximal value was 6 761.30 μg·g-1 water-free soil, and the less value 58.52 μg·g-1 water-free soil. The geostatistical analysis indicated that the spatial distribution characteristic was not obviously reflected by the liner graphs while samples were randomly distribution and independent each other. The separation distance among samples was related to precision of soil DNA content, the effects of non-structure factors (environment factors, disturbed factors) on spatial correlation structure would disappeared due to the separation distance in excess of 18.84 m, and the spatial correlation of soil DNA faded down in plots. Spatial variability in soil DNA in the region was mostly contributed by the influencing factors including soil nitrogen, soil organic matter and content of soil water.

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体，鉴定突变体的表型特征，为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体，观察和测定菌落形态，菌落生长速率，产孢量，孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状，并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列，T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比，发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%，只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12，为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。